Tabiatda va laboratoriyada tabiiy tanlanish Seleksiyaning ta'siri nafaqat laboratoriya tajribalarida, balki tabiatda uzoq muddatli kuzatishlar jarayonida ham o'rganiladi. Birinchi yondashuv son-sanoqsiz real hayotdan ajratib, atrof-muhit sharoitlarini nazorat qilish imkonini beradi

10-bob Viruslar olami va uning evolyutsiyasi Trans. G. Yanus viruslari mutlaqo g'ayrioddiy narsa, ya'ni g'ayrioddiy turli yuqumli agentlar va, ehtimol, o'simlik kasalliklarini, masalan, tamaki mozaikasini keltirib chiqaradigan maxsus turdagi toksin sifatida topilgan. Bu agentlar beri

Filtrlanadigan viruslarning kashfiyoti Viruslar... Faqat elektron mikroskop yordamida oʻn ming marta kattalashtirib koʻrish mumkin boʻlgan, nozik tuzilishi esa yuz ming marta va undan koʻproq boʻlgan tirik mavjudotlar. Virusologiya - bu viruslar haqidagi fan bo'lib, ularning gullab-yashnashi faqat bizning asrimizda mumkin bo'lgan

3.1. Viruslar va prokariotlarning genetik materiali Viruslarning genetik materiali himoya oqsil qobig'i - kapsid bilan o'ralgan bitta nuklein kislota molekulasi (DNK yoki RNK) bilan ifodalanadi. Viruslar o'zlariga qarab turlicha ishlaydi

46. ​​Hujayra kulturalari va ularning turlari. Tanadan chiqarilgan hujayralar, to'qimalar yoki organlar kamida 24 soat davomida o'z hayotiyligini saqlaydigan tizim. Omon qolish: bunda hujayralar ko'paymasdan faqat o'ziga xos hayot faoliyatini saqlab qoladi. O'sish: o'ziga xos hayotiy faollikni saqlab qoladi va ko'payish qobiliyatiga ega. O'sish xususiyatiga ko'ra, ular 3 guruhga bo'linadi: suspenziya; plazma (to'qimalarning qattiq bo'laklarining kulturalari); bir qatlamli. Bir qavatlilar 4 guruhga bo'linadi: birlamchi tripsinizlangan; submadaniyatlar; yarim pog'onali va interleavable. To'xtatib turish: suspenziyalar shaklida o'sadi, hujayralar maxsus vosita bilan ko'payadi va roliklar yordamida doimiy aralashtiriladi. Hujayralar matrasning butun yuzasida o'sadi. Vaktsinalar uchun juda ko'p hujayralar. Plazma: plazma bilan mahkamlangan to'qimalarning bo'laklari, bu to'qima madaniyati. U shisha virusologik oynaga to'qima bo'lagini mahkamlash, keyin chuqur muhitini qo'shish va uni kultivatsiya qilish orqali olinadi; bu holda hujayra o'sishi to'qima bo'lagining periferiyasi bo'ylab qayd etiladi. Mato bo'laklarini olish uchun ishlatiladi. Yagona qatlam: Virusni ko'rsatish uchun. U to'qimalar yoki organlardan tripsin bilan davolash orqali olinadi. Subkulturalar birlamchilardan payvandlash yo'li bilan olinadi. Keyinchalik, bir nechta transplantatsiya bilan yarim transplantatsiya qilinadi. Ular diploid xromosomalar to'plamiga ega. Hujayra madaniyati olingan yoshga yoki to'qimalarga qarab diploiddan omon qolishi mumkin. Agar embrion 80 kungacha bo'lsa. Kattalar uchun - 25 dan ortiq transplantatsiya. 5 dan ortiq eskisi yo'q Transplantatsiya qilinganlar saraton bo'lgan mutatsiyaga uchragan hujayralardir. Ular cheksiz ko'p marta davom etadi. Bular saraton o'simtasining o'zgartirilgan hujayralari. Hela 1956 yildan beri eng mashhur uzluksiz hujayra madaniyatidir. Bu madaniyat dunyodagi barcha laboratoriyalarda mavjud. U ko'plab patogenlarga moslashgan. Birinchi tug'ilgan hayvonlarning bir qator afzalliklari bor: ular o'lmaydi; yuqori o'sish sur'ati; ularning barchasi genetik jihatdan bir hil. Laboratoriyada ular bir idishdan ikkinchisiga qayta ekish orqali saqlanadi.

59. CPD. Bu hujayra madaniyatida virusni ko'rsatish usuli. CPD ularda ko'payadigan virus ta'siri ostida hujayra madaniyatidagi hujayralardagi har qanday o'zgarishlarni anglatadi. To'shakning yuqori qatlamiga qaraganimda past kattalashtirishdan foydalanaman. Infektsiyalangan hujayralarni infektsiyalanmaganlar bilan solishtiring. Farqlar butun bir qatlam bo'ylab yoki faqat yamoqlarda tarqalishi mumkin. Ular Kristas yoki ball bilan baholanadi. Shunday qilib, agar protsessorning butun monopoliyasi o'zgargan bo'lsa, u 4 ta xochga baholanadi; agar ¾ - 3 kr; ½ 2 kr; ¼ - 1 xoch uchun. CPD shakllari virusning biologik xususiyatlariga, hujayralar turiga, infektsiya dozasiga, etishtirish sharoitlariga va boshqalarga bog'liq. Ba'zi viruslar 2-3 kundan keyin, boshqalari esa 1-2 kundan keyin CPDni ko'rsatadi. CPUning 3 shakli: parchalanish– shishadan ajratilgan va madaniy suyuqlikka o'tadigan alohida bo'laklarga hujayralarni yo'q qilish. Yaxlitlash– hujayralar oynaga yopishish qobiliyatini yo'qotadi, ular sharsimon shaklga ega bo'lib, ajralib turadi va o'lgan joyda erkin suzib yuradi. Simplast shakllanishi- hujayra membranalarining erishi, buning natijasida qo'shni hujayralarning sitoplazmalari birlashib, hujayra yadrolari joylashgan yagona butunlikni hosil qiladi. Bunday shakllanishlar simplastlar - ulkan polifag hujayralar deb ataladi. Sinov materialida virus mavjudligini aniqlash uchun kamida 3 ta ko'r-ko'rona o'tishni amalga oshirish kerak. Gemadsoption - qizil qon hujayralarining virusli hujayralar yuzasi bilan bog'lanishi.

51. Rid va Mench bo'yicha virus titrini hisoblash. Titrni o'qish va menyu orqali hisoblash bilan statistik baholangan effekt bilan virusni titrlash. Ushbu titrlash usuli uchun har qanday biologik modeldan foydalanish mumkin, ammo bu model titrlangan virusga (hujayra madaniyati, embrionlar, laboratoriya hayvonlari) sezgir bo'lishi kerak. Infektsiyalangan biologik modellarning yuqumli ta'siriga ko'ra, ular quyidagilarga bo'linadi: klinik jihatdan tan olingan; patomorfologik o'zgarishlarga ko'ra; model vafot etganida; gemagglutininning to'planishi bilan. Ish natijalari virusning dozasiga bog'liq. Yuqumli ta'sirning 50 foizini keltirib chiqaradigan virusning dozasi tebranishlarga eng kam sezgir va barcha mumkin bo'lgan dozalar ichida eng aniqlanishi aniqlangan. Titr samarali 50 foizli dozalarda ifodalanadi. Bu ED 50 ga teng. Amaldagi biologik modelga va olingan effektga qarab, 50 foizlik dozani quyidagi birliklarda ifodalash mumkin: LD 50 - ID 50 ELD 50 EID 50 TsPD 50- bu CPD tomonidan hujayra madaniyatida aniqlangan 50 foizli sitopatogen doza. Agar infektsiyalangan tizimlarda biz ID 50 ta'sirining 50 foizini kuzatmasak, titr o'qish va menyu orqali hisoblanadi: lg LD 50 = lg ECD - (% ECD yillari - 50%) / (ECD ning% yili - ECD ning % yillari) BULARNING HAMMASI lg ko'plik martalariga KO'PLANGAN

36. Virusologiya laboratoriyasida ishlash qoidalari va soatlari. Barcha talabalar xavfsiz tr bo'yicha ko'rsatmalar va o'qitiladi. Ishlab chiqarish binolariga ruxsatsiz shaxslarning kirishi, shuningdek, xalatsiz va almashtiriladigan poyabzalsiz kirish taqiqlanadi. Laboratoriyadan tashqariga xalat va qalpoq bilan chiqish taqiqlanadi. Chekish, laboratoriyada ovqatlanish va oziq-ovqat saqlash. Laboratoriyaga kiradigan barcha materiallar infektsiyalangan deb hisoblanishi kerak. Ish oxirida ish joyi tartibga solinadi va yaxshilab de-identifikatsiya qilinadi. Yuqumli moddalarni o'z ichiga olgan idishlarni etiketlash. Qo'lqop kiygan qo'llar 5 foizli xloramid eritmasi bilan bankada yuviladi, so'ngra qo'lqoplar chiqariladi va ikkinchi marta dezinfektsiya qilinadi, dezinfektsiya qilinadi va yuviladi. ra Laboratoriya virusologining ishi uchta asosiy tamoyilga asoslanadi: xodimlarning yoki virusli materiallar bilan ishlaydigan odamlarning infektsiyasini oldini olish. Materialning ifloslanishini oldini olish (asboblar, idishlar sterildir) binolarni dezinfektsiyali eritma + ultrabinafsha lampalar bilan tozalash. Virusni laboratoriyadan tashqariga (havo, idishlar, qattiq va suyuq materiallar bilan) olib borishning oldini oling. Pipetalar va stakanlarni sterilizatorga tashlash kerak. Virusli probirkalar, to'qimalar - avtoklavga. Santrifugani to'xtaguncha ochmang. Shpritsdan faqat 75 foiz spirt bilan paxta sumkasi yordamida havoni olib tashlashingiz kerak. Filtrli ventilyatsiya tizimi yordamida xonani ventilyatsiya qilish taqiqlanadi.

37. Virus o'z ichiga olgan material bilan xavfsizlik choralari. Viruslarning tashqi muhitda tarqalishini oldini olish. Virus o'z ichiga olgan materialning begona mikroflora bilan ifloslanishini (ifloslanishini) oldini olish. Shaxsiy xavfsizlikni ta'minlash. Ushbu talablarga rioya qilish uchun quyidagi ish qoidalari zarur: ehtiyotkor va ozoda bo'ling; faqat xalatda bo'ling va shkafni o'zgartiring; faqat tugmachali manjetlar, qalpoqcha va doka niqobi bilan ishlang; laboratoriyada tozalik va tartibni qat'iy saqlash; ish stolida begona narsalar bo'lmasligi kerak; Chekish va ovqatlanish taqiqlanadi. Steril asboblar va idishlardan foydalaning. Olovli olov yaqinidagi idishlar bilan ishlang. Barmoqlaringizni og'zingizga qo'ymang. Sterilizatorda ishlatiladigan asboblar. Ishlatilgan pipetkalarni dezinfektsiyali eritmasi bo'lgan idishga yig'ing. Keyinchalik dezinfeksiya qilish uchun qattiq yoki suyuq chiqindilarni (paxta momig'ini) maxsus idishlarga to'plang. Chiqindilarni lavabo yoki hojatxonaga tashlamang.

33. Interferonning virusga qarshi ta'sir qilish mexanizmi. Interferon virusga bevosita ta'sir qilmaydi. Ba'zi hujayra fermentlarining sintezini faollashtirib, faqat hujayraga ta'sir qiladi. Xususan, protein kinaz fermenti va 2,5 oligoasentetaz. Ushbu fermentlarning sintezi haqidagi ma'lumotlar hujayra genlarining ma'lum hududlarida ham joylashgan va repressiv holatda ham mavjud. Havo shovqini ostida protein kinaz va 2,5 iligoAs sintetaza sintezi uchun mas'ul bo'lgan genlarning derepressiyasi mavjud. Va ularning sintezi keskin ortadi. 1) oqsil kinaz havosi ostida, virusli xabarchi RNKning ribosoma bilan bog'lanishini ta'minlaydigan boshlang'ich omil fosforlanadi. Shunday qilib, virusli xabarchi RNK hujayraning ribosoma apparati bilan aloqa qila olmaydi, ya'ni tarjimaning boshlanishi. Va nihoyat, virusli oqsillar va fermentlarning sintezi imkonsiz bo'ladi. 2) interferon ta'sirida hujayradagi 2,5 oligoadenilik kislota sintezini katalizlovchi 2,5 oligoAsintetaza sintezi faollashadi. Ushbu kislota virusli xabarchi RNKlarni yo'q qilish uchun hujayra nukleazalarining ta'sirini o'zgartiradi. Shunday qilib, interferon ta'siri ostida quyidagilar yuzaga keladi: virusli xabarchi RNKning tarjimasini blokirovka qilish; virusli xabarchi RNKlarni yo'q qilish. Interferonning hujayralar ko'payishiga inhibitiv ta'siri: 0 dan 1000 birlik / ml gacha bo'lgan konsentratsiyalarda interferon har qanday to'qimalarda turli xil hujayralarning ko'payishini bostiradi. Interferon ko'plab turdagi hujayralar, shu jumladan birlamchi hujayra madaniyati va o'simta hujayralarining o'sishini tartibga soladi. U ma'lum hujayra oqsillari sintezini bostirishga va interferon tomonidan yangi oqsillarni sintez qilishga asoslangan. Inter T-limfotsitlarning qotil faolligini oshiradi. Katta dozalarda ular antikor shakllanishini inhibe qiladilar. Kichik dozalar, aksincha, antikor shakllanishini rag'batlantiradi. Krilling - kichik dozalarda interf bilan ishlov berilgan hujayralar ishlov berilmagan hujayralarga qaraganda ko'proq interf hosil qiladi. Juda katta dozalar - teskari jarayon.

35. Virus va hujayra o'rtasidagi o'zaro ta'sir turlari. Samarali va samarasiz. Produktiv litik va yashiringa bo'linadi. Samarali: Bu hujayrada virionning yangi avlodi hosil bo'ladigan o'zaro ta'sir turi. Agar hujayra yangi virionni qo'lga kiritgandan so'ng tezda nobud bo'lsa, bu virus va hujayra o'rtasidagi o'zaro ta'sirning samarali litik yo'lidir. Agar virus o'sadigan hujayra uzoq vaqt davomida o'z hayotiyligini saqlab qolsa (tomurcuklanma orqali), u holda bu yashirin turdagi o'zaro ta'sirning mahsulidir. Bekor: Bu tip virionlarning ko'payishi har qanday bosqichda to'xtaganda o'zaro bo'ladi, virion rivojlanmaydi. Virusning hujayra bilan o'zaro ta'siri natijasida hujayrada quyidagi o'zgarishlar yuz berishi mumkin: hujayra degeneratsiyasi- hujayralar avval tartibsiz shaklga aylanadi, so'ngra yumaloq bo'ladi, sitoplazmada donadorlik paydo bo'ladi, so'ngra yadro parchalanadi, keyin hujayra o'ladi. Bunday o'zgarishlar CPD deb ataladi. Xochlarda: 4 xoch - 100% samaradorlik. Simplastlarning shakllanishi- ko'p yadroli hujayralar. Inklyuziv organlarning shakllanishi– yadro ichidagi va plazmatik mb, RNK yoki DNK o'z ichiga olgan. Hujayra transformatsiyasi- onkogen viruslar (RNK retroviruslari). Hujayradagi onkogen virlarning ko'payishi CPD bilan birga kelmaydi. Hujayra doimo virus ishlab chiqaradi. Interferon sintezi.

4. Viruslarning fizik-kimyoviy omillarga chidamliligi. Hayvon viruslarining chidamliligi tashqi omillar ta'sirida nisbatan yaxshi o'rganilgan: harorat, radiatsiya, ultrabinafsha, ultratovush, pH, formaldegid, fenol va boshqalar Bu ta'sirlardan himoya qilish uchun virionlarda oqsil qobig'i mavjud. Protein qobig'ining turli tuzilishi va kimyoviy tarkibi viruslarning o'zgaruvchan barqarorligini belgilaydi. Ushbu xususiyatlarga qarab, xuddi shu omil ba'zi virionlarni butunlay yo'q qilishi mumkin, boshqalari esa yo'q. Masalan, organik erituvchilar: qobig'ida lipidlar bo'lmagan virionlar bu moddalarga chidamli bo'lib, tarkibida lipidlar bo'lganlar tezda yo'q qilinadi. Viruslarning inaktivatsiyasi deganda fizik va kimyoviy omillarning ta'siri natijasida yuzaga keladigan biologik faolligini to'liq yoki qisman yo'qotish tushuniladi. Virusli nuklein kislota va oqsil o'zgarganda, to'liq inaktivatsiya sodir bo'ladi, ya'ni virusning barcha biologik xususiyatlarini yo'qotadi - u faqat yuqumli xususiyatlarini yo'qotadi va immunogenligini saqlab qoladi. Virusga ta'sir qiluvchi kimyoviy va fizik tabiatli agentlarning tabiati va darajasi inaktivlashtiruvchi omilning tabiatiga, dozaga, uzoq vaqt davomida, virus turiga bog'liq. Virus faolsizlantirilganda yoki qobiq oqsillarining parchalanishi, so'ngra uning alohida birliklarga parchalanishi yoki qobiqning umumiy tuzilishini saqlab qolgan holda oqsillarning siqilishi sodir bo'lishi mumkin. Uzoq muddatli va past isitish bilan kislotali va ishqoriy muhit ta'sirida parchalanish kuzatiladi, koagulyatsiya va siqilish formaldegid, yuqori harorat yoki fenol ta'sirida sodir bo'ladi. Konsentratsiya va davomiyligiga bog'liq. Shunday qilib, ba'zi hollarda oqsillarning koagulyatsiyasi yadro kislotalarini yo'q qilish bilan birga keladi va virus qaytarilmas infektsiyani yo'qotadi. Boshqa hollarda virusning ko'payish qobiliyati saqlanib qoladi. Glitserin bilan konservalangan.

60. PCR. Usul printsipi: ma'lum bir virusga xos bo'lgan gen aniqlanadi - DNK molekulasining bitta oqsil sintezi uchun ma'lumotni olib yuradigan qismi. Keyinchalik bu gen PCR yordamida sinov materialida aniqlanadi. Bu reaksiya genning qo'shimcha nusxalarini hosil qilish imkonini beradi - probirkadagi DNK bo'limining kuchaytirilishi. Tadqiqot maqsadiga qarab, mo ning turi yoki jinsini aniqlash mumkin. PCRning mohiyati: DNK molekulasi 90-94 darajaga qadar isitiladi. Bu qo'sh spiralning azotli asoslari orasidagi vodorod aloqalarining yo'q qilinishiga olib keladi va keyin DNK polimiraza fermenti ishtirokida 52 g gacha sovutiladi. Tezlikning keyingi oshishi yangi DNK molekulasi - qo'shimcha shablon sinteziga olib keladi. Ushbu protsedura ko'p marta takrorlanadi, natijada kattaroq bo'laklar paydo bo'ladi. Ko'rsatkich elektroforez yoki etiketli DNK probi yordamida amalga oshiriladi. Asosiy komponentlar: DNK polimiraza termostabil; 20 ta nukleotiddan iborat oligonukleotid; trifosfatlar; agaroz jelida elektroforez uchun kuchaytirgich, shisha idishlar va reagentlar. O'rnatish: DNK namunasini olish. Buning uchun o'rganilayotgan material bufer yoki distillangan suvda to'xtatiladi. Natriy OH qo'shing va 7 daqiqa ushlab turing. Aralash neytrallanadi. Katta zarrachalarni cho'ktirish uchun lizat 10 daqiqa davomida santrifüj qilinadi. PCR - bu DNK fragmentining berilgan genini kuchaytirish. Keyin u 3 soat davomida termal tsiklda eritiladi. Amplifikatsiya ko'rsatkichi - namuna DNKni ajratish uchun agaroz jelida elektroforezga duchor bo'ladi. 30 daqiqadan so'ng agaroza apparatda polimizatsiya qilinadi va agarozada teshiklar hosil bo'ladi. Aralashmadan 10 mkl olinadi va 5 mkl bo'yoq bilan aralashtiriladi. Aralash quduqlarga qo'shiladi va elektroforez 40 daqiqa davomida amalga oshiriladi. Plastinka chiqariladi va bromid eritmasida 10 daqiqa davomida bo'yaladi. Keyin agaroza transilluminatorga joylashtiriladi va natijada olingan tarmoqli naqshlari suratga olinadi. Ultraviyole nurlanish natijasida aniqlangan chiziqlar DNK parchalaridir.

49. Hujayra kulturalarini yuqtirish usuli. Hujayra kulturalarida viruslarni ko'rsatish. INFEKTSION: bu maqsadda doimiy hujayrali monoqatlamli naychalar tanlanadi. O'sish muhiti drenajlanadi va hujayralar Hank eritmasi bilan bir necha marta yuviladi. Har bir naychaga 0,2 - 0,1 ml virus moddasi qo'shiladi va silkitish orqali hujayralarning butun qatlamiga teng ravishda taqsimlanadi. Ushbu shaklda naychalar hujayralar yuzasida virusning adsorbsiyasi uchun 22 yoki 37 daraja haroratda 1 dan 2 soatgacha qoldiriladi. Keyin probirkalardan virus moddasi chiqariladi va probirkaga parvarish qiluvchi vosita quyiladi (1-2 ml). Virus izolyatsiya qilingandan so'ng hujayralarning monoqatlami Hank eritmasi bilan 2 marta yuviladi va keyin qo'llab-quvvatlovchi vosita quyiladi. Ko'rsatkich: CPD bo'yicha; RGAd; blyashka shakllanishi bilan; hujayra ichidagi qo'shimchalar; REEF; elektron mikroskop

54. RTGA. RGA. RTGA: mohiyati– virus maxsus sarum bilan aralashtirilganda virus gemagglyutinatsiyalash xususiyatini yo‘qotadi. Maqsadlar- ajratilgan virusni aniqlash; sinov zardobida antikorlarni aniqlash va ularning titri. Komponentlar- to'g'ridan-to'g'ri serovariant uchun: virusli material, o'ziga xos sarum, eritrotsitlarning 1% suspenziyasi, suyultirish uchun fiziologik eritma. Retrospektiv uchun - sinov zardobida, standart antigen ma'lum dozada 4 GAE (virusni suyultirish titri) 4 GAE - 1:32. Sxema- sarumning har bir suyultirilishiga 4 GAE dozasida teng hajmdagi standart antijen (virus) qo'shing. Xona haroratida 30 daqiqa aloqa qiling. Har bir quduqqa zardob suyultirishlari va 4 ga virusning doimiy dozasi bilan teng miqdorda qizil qon tanachalari suspenziyasi qo'shing. Xona haroratida 30-60 daqiqa aloqa qiling. Buxgalteriya hisobi reaktsiyalar kristallarda amalga oshiriladi. agar u ortiqcha bo'lsa, unda aglutinatsiya yo'q, agar u daqiqalar bo'lsa, u holda gemagglyutinatsiya bo'ladi; Sinov sarumidagi antikor titri qizil qon hujayralarining aglutinatsiyasini butunlay kechiktiradigan sarumning maksimal suyultirilishidir.RGA: mohiyat: qizil qon hujayralari yuzasida virusning adsorbsiyasida, bu yopishtirishga olib keladi. Maqsadlar: ko'rsatma; haenda virus titrlash uchun. Komponentlar: virus; 0,5 qizil qon hujayralari suspenziyasi; tayyorlash uchun tuz eritmasi. Post sxemasi: virusni ikki marta suyultirishni tayyorlang; har bir virus rivojlanishiga teng hajmdagi 0,5% qizil qon tanachalari suspenziyasini qo'shing; xona haroratida 30-60 daqiqa aloqa qiling. Buxgalteriya hisobi: kristlarda. 4 krista - 100% aglutinatsiya. 3 krist - 75% . 1 o'zaro faoliyat aglutinatsiya. 1 haen - qizil qon hujayralarining 50% aglutinatsiyasiga olib kelishi mumkin bo'lgan virusning maksimal suyultirilishi.

57. Elishay. Mohiyat: antigen + etiketli sarum bog'langanda, ferment substratni parchalaydi. Rangli reaktsiya mahsulotini hosil qilish uchun antigen + konjugat kompleksi hosil bo'ladi, yorug'lik mikroskopida yoki ingl. Maqsad: aniqlash. Komponentlar: virusli soda moddasi, konjugat, substrat. O'rnatish sxemasi: hujayra kulitrasi sovutilgan aseton bilan mahkamlanadi. Ular quritiladi va konjugat ularga qo'llaniladi. Nam xonada 37 daraja haroratda 1-2 soat davomida inkubatsiya qiling. Tuzli eritma bilan yuving, distillangan suv bilan yuving va quriting. Unga bir necha tomchi substrat eritmasi qo'llaniladi, 5-10 daqiqa davomida inkubatsiya qilinadi, so'ngra sho'r suvda yuviladi va nozik suv bilan yuviladi. Buxgalteriya hisobi: bu holda, ya'ni antigen borligida, konjugat qo'llanilgandan so'ng, ferment bilan belgilangan antigen plyus antikor kompleksi hosil bo'ladi. Substrat qo'llanilgandan so'ng, u ferment ta'sirida parchalanib, yorug'lik mikroskopida aniq ko'rinadigan rangli mahsulotni hosil qiladi.

56. RSK. Mohiyat: iltifotni antigen plyus antikor kompleksiga bog'lash. Ushbu tizimda bepul iltifotning yo'qligi gemolizinning indikator tizimida saqlanishi bilan baholanadi. Maqsadlar: aniqlash; test qon zardobida antikorlarni va ularning titrini aniqlash. Komponentlar: 2 ta tizim - 1 (virus o'z ichiga olgan material; o'ziga xos sarum;) (sinov sarum; standart antijen). 2) gemolitik tizim (indikator) - qo'y eritrotsitlarining 2-3% suspenziyasi antigen hisoblanadi; gemolizin (gemolitik sarum) antikor hisoblanadi. Antikorlar antigenga mos keladi. Va faqat 1 ta reaktsiya uchun iltifot: agar birinchi bo'lsa, iltifot o'rganilayotgan tizim bilan aloqa qilganda gemolizda kechikish bo'ladi. Agar ikkinchisida qizil qon tanachalari parchalansa, to'liq gemoliz bo'ladi. O'rnatish sxemasi: reaksiya birinchi bo'lib o'rganilayotgan tizimda amalga oshiriladi, so'ngra indikator sistema bir xil probirkaga qo'shiladi. Buxgalteriya hisobi: ijobiy RSC - kechiktirilgan gemoliz. Salbiy - to'liq gemoliz.

7. Virusli oqsillar. Aminokislotalardan iborat. Virusli oqsilning tarkibi aminokislotalarning almashinish tartibiga bog'liq bo'lib, bu tartib virus genomidagi genetik ma'lumotlar bilan belgilanadi. Virusli oqsillar strukturaviy va strukturaviy bo'lmaganlarga bo'linadi. Strukturaviy oqsillar etuk virionlarning bir qismidir. Strukturaviy bo'lmagan b etuk virionlarga kirmaydi, lekin ko'payishning ma'lum bosqichlarida majburiydir. StrukturaviyStrukturaviy bo'lmagan

8. Virusli fermentlar. Ular tabiatan proteindir. Ular to'g'ridan-to'g'ri virion bilan bog'lanishi mumkin, lekin ular bog'liq emas - tizimli emas. DNKda RNK uchun: RNKga bog'liq DNK polimiraza - u hujayrada mavjud emas, u RNK va DNKni o'z ichiga olgan "-" uchun zarur bo'lib, retroviridae vir oilasida virus genomini o'zgartiruvchi fermentni o'z ichiga oladi RNKga bog'liq DNK polimiraza. Bu fermentning nomlari bor: revertaz, teskari transkriptaza. Virusli oqsillarni hosil qilishda ishtirok etadigan fermentlar: proteazlar, protein kenazasi.

52. RN.Mohiyat: Virus ma'lum bir sarum bilan o'zaro ta'sir qilganda, virus o'zining infektsion xususiyatlarini, hujayralarda ko'payish qobiliyatini yo'qotadi. Maqsadlar: ajratilgan virusni aniqlash, qon zardobida va antikor titrida antikorlarni aniqlash. Komponentlar: virus o'z ichiga olgan material, o'ziga xos sarum, biologik model. Agar retrospektiv bo'lsa: test qon zardobi, standart antijen, biologik model. Umumiy o'rnatish sxemasi: antigen va antikorni aralashtirish, 30-40 daqiqa davomida aloqa qilish, 37-38 daraja haroratda maksimal 2 soat; biologik modelni yuqtirish uchun antigen plyus antikor aralashmasi ishlatiladi; kuzatish va buxgalteriya hisobi. Buxgalteriya hisobi: musbat pH tirik, manfiy pH o'lik degan ma'noni anglatadi.

53. RDP.Mohiyat: agar jelida bir-biridan bir xil masofada joylashgan bir xil antigen va antikor bir-biriga qarab tarqalib, uchrashish joyida oq chiziq shaklida cho'kma hosil qiladi. Maqsadlar: ajratilgan virusni aniqlash, test zardobida antikorlarni aniqlash. Komponentlar: virus o'z ichiga olgan material, o'ziga xos sarum, agar-gel. Retrospektiv uchun: qon zardobini, standart antijenni, agar jelini tekshirish. Bosqich sxemasi: agar qoplamalari shisha slaydda tayyorlanadi, quduqlar tayyorlanadi, reaktsiya komponentlari ma'lum bir sxema bo'yicha quduqlarga qo'shiladi, reaksiya bo'lgan stakan 37-38 C da termostatga joylashtiriladi. 48 soatdan keyin reaksiya qayd etiladi. Ijobiy reaktsiya - oq yog'ingarchilik chizig'ining shakllanishi.

55. RGAd, RTGAd. RGAd: Mohiyat: virus bilan zararlangan hujayralar yuzasida eritrotsitlarning adsorbsiyasida. Maqsadlar: virus belgisi. Komponentlar: virus o'z ichiga olgan material bilan zararlangan hujayra madaniyati; qizil qon hujayralari suspenziyasi . Bosqich sxemasi: bir qatlamli hujayra madaniyatini sinov materiali bilan oldindan yuqtirish. Madaniyatlar qo'llab-quvvatlovchi madaniyat muhitiga tushiriladi. Hanks eritmasi bilan yuving. Qizil qon hujayralari suspenziyasi qo'shiladi. Xona haroratida 5-15 daqiqa aloqa qiling. Buxgalteriya hisobi: yorug'lik mikroskopi ostida amalga oshiriladi. Ijobiy - qizil qon hujayralari hujayralarga adsorbsiyalanadi; salbiy - qizil qon hujayralari erkin suzadi. RTGAd: mazmuni: virusli hujayralar yuzasiga o'ziga xos antikorlarni bog'lashda, bu eritrotsitlar hujayralarida adsorbsiyani inhibe qilishga olib keladi. Maqsadlar: ajratilgan virusni aniqlash. Komponentlar: kontaminatsiyalangan hujayra madaniyati; maxsus sarum; qizil qon hujayralarining suspenziyasi. Bosqich sxemasi: bir qatlamli hujayra madaniyati bir qatlamli dastlabki virus o'z ichiga olgan material bilan oldindan yuqtiriladi. Oziqlantiruvchi vositaga quying va 0,8 ml maxsus sarum qo'shing. 20-30 daqiqaga murojaat qiling. Qizil qon hujayralari suspenziyasi qo'shiladi. Aloqa 5-15 daqiqa. Buxgalteriya hisobi: Boshqarish uchun ular RGA-ni o'rnatishlari kerak. Eksperimental naychalarda hisobga olish: ijobiy - qizil qon tanachalari erkin suzadi, salbiy - qizil qon tanachalari ham erkin suzadi. Ijobiy - adsorbsion, salbiy - erkin suzuvchi nazorat naychalarida buxgalteriya hisobi.

6. Virusli nuklein kislotalar.+ RNK virusli nuklein kislota bo'lib, u ham informatsion RNK funktsiyasiga ega. RNK+ dagi oqsil sintez qilish tizimi haqidagi ma'lumotlar transkripsiyasiz darhol genomik RNKga uzatiladi. -RNKni o'z ichiga olgan viruslar bir zanjirli RNKga ega bo'lgan viruslar bo'lib, bunday viruslarda messenjer RNKning sintezi (transkripsiya) virusga xos ferment yordamida shablon minus genomik RNKda sodir bo'ladi; gnom RNK, RNKga bog'liq RNK polimiraza bilan. Plyus va minus RNK zanjirlarini o'z ichiga olgan viruslar mavjud, ular orasida adenoviruslar va paramiksoviruslar mavjud. Ikki zanjirli DNKdagi genomik ma'lumotlar ikkala zanjirda ham kodlangan Nuklein kislotalar alohida nukleotidlardan tashkil topgan polinukleotidlar bilan ifodalanadi. Ularning nuklein kislotadagi miqdori har xil. Har bir nukleotid 3 ta subbirlikdan iborat: fosfor kislotasi qoldig'i, uglevod va azotli asos.

9. Viruslarning tuzilishi. Asosiy shakllar. Simmetriya turlari. Tuzilishi: DNK: odatda ikki zanjirli, gen ma'lumotlari ikkala ipda ham kodlangan. Virusli DNK chiziqli, aylana shaklida joylashishi mumkin. Bir ipli bo'lishi mumkin. Virusli RNKlar: ko'pincha bir zanjirli, kamroq tez-tez ikki ipli. Chiziqli, aylana shaklida, parchalangan. Qoida tariqasida, ular 11-12 bo'lakdan iborat. Bir zanjirli vir RNK ikki xil bo'lishi mumkin: plyus zanjirli va minus zanjirli RNK (manfiy genom) Simmetriya turlari: oqsil bo'linmalarining (kaposmerlarning) joylashishi virionning simmetriya turini aniqlaydi - spiral, kubik, birlashtirilgan. Spiral Bu simning bir turi bo'lib, unda kapsomerlar nuklein kislota atrofida spiral shaklida joylashgan. Katta viruslar va ba'zi o'rta o'lchamli viruslar bu turdagi simga ega. Shakli: novdasimon, poli shaklli, sharsimon, ovalsimon. Tayoqcha shaklidagi viruslarda kapsid bir xil diametrli spiral burilishlarda bir-biriga yaqin joylashgan kapsomerlardan iborat bo'lib, sferik viruslarda kapsomerlar spiral shaklida joylashgan, ammo turli diametrli. Kub turi: Ko'pgina kichik viruslar va o'rta o'lchamli viruslarning katta qismi unga ega. Bunday viruslarning shakli sharsimondir. Kapsidning kapsomeralari oddiy izometrik jism atrofida bo'lgani kabi kislota yadrolari atrofida joylashgan. Bunday viruslarning oqsil qobig'i ikosayder shakliga yaqinlashadi, oddiy 20 qirrali yuz. Birlashtirilgan simmetriya turi: spiral va kubikdan iborat. Koksviridae oilasining barcha faglari va ba'zi murakkab viruslari mavjud. Ular kubik tashqi qobig'i va spiral kapsid qobig'iga ega. Faglar ikoseindrsimon bosh va spiral jarayonga ega.

18. Virusli ko'payishning birinchi fazasining asosiy bosqichlari. Bu hujayra infektsiyasining bosqichidir, bu bosqichda virion hujayra bilan aloqa qilishi, hujayra ichiga kirib, yechinishi kerak. Birinchidan virionlarning hujayra yuzasida adsorbsiyalanish bosqichi ikki yo'l bilan sodir bo'lishi mumkin: fizik-kimyoviy (nospesifik); retseptorlari (maxsus). Fizik-kimyoviy yo'l virus oqsillarining musbat zaryadlangan guruhlari va hujayra devorining manfiy zaryadlangan karboksin, sulfat va fosfat guruhlari o'rtasida paydo bo'ladigan sirt elektrostatik kuchlarining o'zaro ta'siri bilan belgilanadi. Virusli oqsil retseptorlarining hujayra devori yuzasidagi komplementar retseptorlari bilan o'ziga xos o'zaro ta'siriga asoslangan retseptor. Viruslarning retseptorlari va ma'lum bir virusga sezgir hujayralar retseptorlari qo'shimcha konfiguratsiyaga ega (qulf kaliti kabi). Agar hujayra sezgir bo'lmasa, reabsorbsiya hech qachon sodir bo'lmaydi. Ikkinchi penetratsiya - turli xil viruslar uchun turli yo'llar bilan sodir bo'ladi: viropexys yordamida; qobiqlarni birlashtirish orqali. Viropeksis- bu yo'l pinotsitozga o'xshaydi. Birinchidan, hujayra yuzasida adsorbsiya joyida membrananing hujayra devorining invaginatsiyasi sodir bo'ladi, so'ngra membrananing chetlari hujayraning ichki qismi bilan yopiladi, hujayra vakuolasida virion barcha membranalari bilan paydo bo'ladi. tomonidan sintez- bu holda virusga xos fermentlar ta'sirida virus qobig'i va hujayra membranasining bir-birini qabul qiladigan joylari eriydi va hujayrada faqat virusli nuklein kislota paydo bo'ladi, virus qoldiqlari esa hujayra ichiga joylashadi. hujayra konverti. Uchinchi bosqich- deprotenatsiya - membranalardan ajralib chiqish - virusning hujayraga kirish yo'llariga bog'liq. Agar deprotonizatsiya membranalarni birlashtirish orqali alohida bosqich sifatida ajratilmasa, u virusning kirib borishi bilan bir vaqtda sodir bo'ladi. Agar penetratsiya viropeksis orqali bo'lsa, u holda virusli nuklein kislotaning konvertlardan chiqishi virus konvertlarini tashkil etuvchi oqsillar, lipidlar va yog'lar yo'q qilinganidan keyin boshlanadi. Barcha bosqichlar haroratga bog'liq.

20. Transkripsiya. Bu genetik ma'lumotni virusli nuklein kislotadan virusli ma'lumot RNKga qayta yozish, genetik kod qonunlariga muvofiq yangi sintezlanadi. (virus oqsilni sintez qilinayotgan hujayraga taqdim etishi va RNKga aylanishi kerak). Transkripsiyaning yakuniy mahsuloti virusli xabarchi RNKdir. Bir zanjirli + RNKlar transkriptga ega emas, lekin ularning genomik virusli RNKsi ma'lumot vir RNKga ega. Bir zanjirli -RNKda genom messenjer RNK funktsiyasini bajara olmaydi va uning RNK virusga xos ferment RNKga bog'liq RNK polimiraza yordamida transflekslanadi. CHIZIM!

21. Translyatsiya. Bu virusli messenjer RNKlaridagi genetik ma'lumotni ma'lum bir aminokislotalar ketma-ketligiga aylantirish jarayonidir. Virusli xabarchi RNKga kiritilgan to'rtta asos 20 ta aminokislota kodiga aylantirilganda tarjima sodir bo'ladi. Tarjimaning yakuniy mahsuloti virusli oqsillardir. Protein sintezi hujayra ribosomalarida sodir bo'ladi. 3 bosqichdan iborat: tarjimaning boshlanishi va tarjimaning boshlanishi; davom etish; tugatish - translyatsiyaning tugashi. Initiatsiya tarjimaning boshlanishi uchun zarur bo'lgan komponentlar majmuasini shakllantirishga asoslanadi, ya'ni initsiatsiya kompleksi ham virusli xabarchi RNK tomonidan ribosomani tanib olish va uning qopqoq deb ataladigan ma'lum sohalarga bog'lanishiga asoslanadi. Bu metillangan guanin. Qopqoqni tanigandan so'ng, ribosoma ma'lumotni dekodlash boshlanadigan joyga etib borguncha messenjer RNK molekulasidan pastga siljiydi.

5. Viruslarning kimyoviy tarkibi. Viruslar quyidagilardan iborat nuklein kislotalar (DNK, RNK). Nuklein kislotalar alohida nukleotid bo'lmaganlardan tashkil topgan polinukleotidlar bilan ifodalanadi. Har bir nukleotid 3 ta subbirlikdan iborat: fosfor kislotasi qoldig'i, uglevod va azotli asos. Virusli oqsillar : Aminokislotalardan tashkil topgan. Virusli oqsilning tarkibi aminokislotalarning almashinish tartibiga bog'liq bo'lib, bu tartib virus genomidagi genetik ma'lumotlar bilan belgilanadi. Virusli oqsillar strukturaviy va strukturaviy bo'lmaganlarga bo'linadi. Strukturaviy oqsillar etuk virionlarning bir qismidir. Strukturaviy bo'lmagan b etuk virionlarga kirmaydi, lekin ko'payishning ma'lum bosqichlarida majburiydir. Strukturaviy Virion oqsillari virionda joylashishiga qarab quyidagi guruhga bo'linadi: kapsid oqsillari - kapsidda; superkapsid b - superkapsidda (asosan protein, yog'lar va uglevodlar ham mavjud); matritsa oqsillari - membrana qatlamining oqsillari; virus yadrosining oqsillari fermentlar bilan ifodalanadi. Strukturaviy bo'lmagan– bajaradigan funksiyalariga qarab quyidagilarga bo‘linadi: virus genomini ifodalash regulyatori; hujayra biosintezi inhibitörleri; hujayralarni yo'q qilish induktorlari; virusli oqsil prekursorlari tarkibiy vir oqsillari; ba'zi virusli fermentlar etuk virionlarning bir qismi emas. Lipidlar: asosan murakkab viruslarda virionning surerkapsid qobig'ining bir qismiga kiradi. Ularning barchasi vir genomi tomonidan kodlanmagan va hujayradan kelib chiqqan. Ular fosfolipidlar va glikolipidlar bilan ifodalanadi. Uglevodlar: obol superkapsidining bir qismidir, virus genomi tomonidan kodlanmagan va glikoproteinlar va glikolipidlar bilan ifodalangan hujayrali kelib chiqishi. . Virusli fermentlar: Ular tabiatan proteindir. Ular to'g'ridan-to'g'ri virion bilan bog'lanishi mumkin, lekin ular bog'liq emas - tizimli emas. Axborot almashish bosqichida erta polimirazlar va erta replikalar fermentlari ishtirok etadi. Ular hujayra biosintezining ingibitorlari sifatida tasniflanadi. Virus genomini o'tkazuvchi fermentlar: DNKda o'z ichiga olgan viruslar - DNKga bog'liq RNK polimirazlar hujayrada mavjud bo'lib, ba'zi hollarda u viruslarga kirishi mumkin, boshqalarida esa yo'q; U hujayrali yoki virusli kelib chiqishi mumkin. Yadroda ko'payadigan DNK o'z ichiga olgan viruslar hujayradan kelib chiqadi. Sitoplazmada - virusli kelib chiqishi - virusga xos.

RNK uchun: RNKga bog'liq DNK polimiraza - u hujayrada mavjud emas, u RNK va DNKni o'z ichiga olgan "-" uchun zarur bo'lib, retroviridae vir oilasida virus genomini o'zgartiruvchi fermentni o'z ichiga oladi RNKga bog'liq DNK polimiraza. Bu fermentning nomlari bor: revertaz, teskari transkriptaza. Virusli oqsillarni hosil qilishda ishtirok etadigan fermentlar: proteazlar, protein kenazasi.

13. Bakteriofaglar. Bakterial virus. DNK va RNK bakteriofaglari ma'lum. Ko'pchilik fag DNKsi ikki zanjirli. RNK faglari bir zanjirli. Fag nuklein kislotasi ko'p burchakli kapsid (bosh) bilan o'ralgan bo'lib, unga ko'p faglarda qo'shimcha (dum) biriktirilgan. Boshlarning diametri taxminan 60-95 nm, jarayonlarning uzunligi esa 250 nm, qalinligi 10-25 nm. Jarayon bakteriyaga biriktiruvchi tuzilma bo'lib xizmat qiladi. b va mikrob hujayralari o'rtasidagi o'zaro ta'sir murakkab biologik jarayon bo'lib, uning natijasi faglarning xususiyatlariga bog'liq bo'lib, bakteriya hujayralarining parchalanishi bilan namoyon bo'ladi. diagnostika uchun bakteriofaglar qo'llaniladi (sibir yarasi); bakterial infektsiyalarni davolash uchun; inf (salmonellyoz) ning oldini olish uchun. CHIZIM!

22. Virusli DNK replikatsiyasi.

23. Virusli RNK replikatsiyasi. Salbiy genomga ega bir zanjirli RNK:

25. Virionlarning yig'ilishi va hujayradan chiqishi.

: etuk virionlar (oddiy viruslar) hosil bo'lgan hujayraning portlashi, yorilishi, yo'q qilinishi, hujayra nobud bo'ladi. Murakkab tuzilmalar kurtaklanishi bilan chiqadi, ya'ni hujayra devori orqali chiqib, kurtaklanadi. Bunday holda, hujayra darhol o'lmaydi, lekin uning zahiralari tugaganda

19. Ko'payishning ikkinchi bosqichi.Tutilish bosqichi: axborotni o'zgartirish bosqichi. Ushbu bosqichda hujayra genomining funktsiyasi bostiriladi, chunki nuklein kislota virusni bloklaydi va virusli fermentlar hujayraning genetik apparati va hujayraning sintez tizimlarini bloklaydi. Bu hujayraning o'z uyali komponentlarini ko'paytirishni to'xtatib, tashqi komponentlarni ko'paytirishga o'tishiga olib keladi. Bu erda erta replikalar va erta polimirazlar ishtirok etadi. Transkripsiya: Bu genetik ma'lumotni virusli nuklein kislotadan virusli ma'lumot RNKga qayta yozish, genetik kod qonunlariga muvofiq yangi sintezlanadi. (virus oqsilni sintez qilinayotgan hujayraga taqdim etishi va RNKga aylanishi kerak). Transkripsiyaning yakuniy mahsuloti virusli xabarchi RNKdir. Bir zanjirli + RNKlar transkriptga ega emas, lekin ularning genomik virusli RNKsi ma'lumot vir RNKga ega. Bir zanjirli -RNKda genom messenjer RNK funktsiyasini bajara olmaydi va uning RNK virusga xos ferment RNKga bog'liq RNK polimiraza yordamida transflekslanadi. CHIZIM!Efir: Bu virusli messenjer RNKlaridagi genetik ma'lumotni ma'lum bir aminokislotalar ketma-ketligiga aylantirish jarayonidir. Virusli xabarchi RNKga kiritilgan to'rtta asos 20 ta aminokislota kodiga aylantirilganda tarjima sodir bo'ladi. Tarjimaning yakuniy mahsuloti virusli oqsillardir. Protein sintezi hujayra ribosomalarida sodir bo'ladi. 3 bosqichdan iborat: tarjimaning boshlanishi va tarjimaning boshlanishi; davom etish; tugatish - translyatsiyaning tugashi. Initiatsiya tarjimaning boshlanishi uchun zarur bo'lgan komponentlar majmuasini shakllantirishga asoslanadi, ya'ni initsiatsiya kompleksi ham virusli xabarchi RNK tomonidan ribosomani tanib olish va uning qopqoq deb ataladigan ma'lum sohalarga bog'lanishiga asoslanadi. Bu metillangan guanin. Qopqoqni tanigandan so'ng, ribosoma ma'lumotni dekodlash boshlanadigan joyga etib borguncha messenjer RNK molekulasidan pastga siljiydi. Virusli DNK replikatsiyasi: Ikki zanjirli DNK replikatsiyasi: Ikki zanjirli DNK molekulasi avval hujayra nukleaza fermentlari yordamida 2 ta alohida zanjirga bo'linadi, so'ngra virusli DNK zanjirlaridan birida matritsa bo'lgan virusli axborot DNKsi hosil bo'ladi. Bu virusga xos yoki hujayrali ferment DNKga bog'liq bo'lgan RNK polimirazasi yordamida sodir bo'ladi. Keyin virusli infor RNK hujayra ribosomasiga o'tadi, bu erda translyatsiya virusli oqsillar va fermentlar, shu jumladan DNK polimiraza fermenti hosil bo'lishi bilan sodir bo'ladi. DNK polimiraza yordamida hujayra nukleotidlaridan DNKning ikkinchi qo'shimcha zanjiri quriladi. Shunday qilib, yangi ikki zanjirli DNK molekulalari sintezlanadi. Bir zanjirli DNK replikatsiyasi: DNKning yagona zanjirlari ijobiy qutbga ega. Virusga xos DNKga bog'liq DNK polimiraza fermenti yordamida virusning bir zanjirli DNK matritsasida komplementar minus DNK zanjiri hosil bo'ladi. Ikki spiralli struktura sintezlanadi, bu replikativ shakl deb ataladi. Keyin shablonda replikativ shaklning minus iplari replikativ shakldan DNKning ortiqcha iplarini siqib chiqarish orqali bir ipli DNKning ortiqcha iplarini hosil qiladi. Virusli RNK replikatsiyasi: manfiy genomga ega bir zanjirli RNK: Hujayra ichiga kirgandan so'ng darhol virusli inf RNK plyus hosil bo'lishi bilan transkripsiya sodir bo'ladi. Bunda virusga xos ferment RNKga qaram RNK polimiraza ishtirok etadi. Vir inf RNK keyinchalik oqsillarni va RNK polimiraza fermentini hosil qilish uchun tarjima qilinadi. Keyinchalik, RNK polimirazasi yordamida matritsada ma'lumotli RNKning plyus zanjirlarida qiz bir zanjirli minus RNK zanjirlari hosil bo'ladi. Ijobiy genomli bir zanjirli RNK: Hujayra ichiga kirgandan so'ng, ortiqcha RNK darhol ribosomalarga bog'lanadi, u erda oqsillar va fermentlarni, shu jumladan RNK replikaza fermentini hosil qilish uchun tarjima qilinadi. Keyin RNK replikaza ta'sirida replikativ shakl hosil bo'ladi. Shablonda replikativ shaklning minus RNKsi replikativ shakldan siqib chiqargan holda ortiqcha RNK zanjirlarining tasvirini yaratadi. Ikki zanjirli virusli RNK replikatsiyasi: messenjer virusli RNKlarning sintezi RNKga bog'liq RNK polimiraza fermenti yordamida ikki zanjirli RNK shablonida sodir bo'ladi. RNK zanjiri shablonidagi transkripsiya, har bir fragment alohida transkripsiya qilinadi. Keyin ular oqsillarni hosil qilish uchun tarjima qilinadi va RNK polimiraza fermenti bu ferment yordamida xabarchi RNKning ortiqcha zanjirlarida RNKning komplementar minus zanjirlarini, ya'ni ikki zanjirli RNKni hosil qiladi. Virionlarning yig'ilishi va ularning hujayradan chiqishi: Infektsiyalangan hujayrani yig'ish, etishtirish va undan chiqishning 2 ta strategiyasi: hujayralar ichida yig'ilish va kamolotni amalga oshirish; virion yig'ilishining oxirgi bosqichining infektsiyalangan hujayradan chiqishi bilan kombinatsiyasi.

Yig'ish oddiy agregatsiya yo'li bilan amalga oshiriladi, ya'ni vir oqsilining nuklein kislota bilan birikmasi fizik-kimyoviy omillar ta'sirida sodir bo'ladi, ya'ni o'z-o'zidan yig'ilish sodir bo'ladi. U birlashtirish va o'ziga xos oqsil bo'lmagan va oqsil-nuklein kislotalarni tanib olishga asoslangan. Nukleokapsid hosil bo'ladi. Oddiy viruslar uchun bu erda o'z-o'zini yig'ish jarayoni tugaydi. Murakkab viruslarda o'z-o'zini yig'ish jarayoni boshqacha tarzda amalga oshiriladi. Proteinning bir qismi oddiy viruslardagi kabi hosil bo'lgan nukleokapsidning shakllanishiga boradi va oqsillarning bir qismi hujayra membranasiga o'tadi. Yaratilgan nukleokapsid keyinchalik u erga ko'chiriladi. Va superkapsid qobig'ining paydo bo'lishi virion hujayradan chiqqanda sodir bo'ladi, ya'ni nukleokapsid hujayra membranasiga o'tgan oqsillar bilan qoplangan va hujayradan chiqib ketganda yog'lar va uglevodlar ushbu tashqi qobiq ichiga o'rnatilgan. . Chiqishning ikki yo'li mavjud: etuk virionlar (oddiy viruslar) hosil bo'lgan hujayraning portlashi, yorilishi, yo'q qilinishi, hujayra nobud bo'ladi. Murakkab tuzilmalar kurtaklanishi bilan chiqadi, ya'ni hujayra devori orqali chiqib, kurtaklanadi. Bunday holda, hujayra darhol o'lmaydi, lekin uning zahiralari tugaganda.

62-63. Qo'y va echki poxi(Caprippoxvirus jinsi). Qo'y va echkilarning yuqumli ektimasi(Parapoxvirus jinsi).Oila: poxviridae. DNK o'z ichiga olgan. Ko'payish xususiyatlari: virusning genomi juda katta, hatto infektsiyalangan hujayralarda ham replikatsiya 6 soatdan keyin tugaydi. Penetratsiya virusli va hujayrali membranalarning birlashishi natijasida sodir bo'ladi. Penetratsiyadan so'ng, ikki zanjirli DNK bo'linadi va bir vaqtning o'zida ikkala DNK zanjirida replikatsiya boshlanadi. Bundan tashqari, virusli komponentlarning sintezi hujayralar sitoplazmasida sodir bo'ladi. Sitoplazmada virion birikmasi. Tomurcuklanma orqali chiqing.

2. Hayvonlarning infeksion patologiyasida viruslarning ahamiyati. Hozirgi vaqtda hayvonlar, odamlar va o'simliklarning yuqumli patologiyasida virusli kasalliklar katta ahamiyatga ega. Ularning roli bakterial, mikotik va protozoal kasalliklarning kamayishi va yo'q qilinishi bilan ortadi. Virusli kasalliklar tibbiyotda taxminan 80 foizni, veterinariyada esa 50 foizni tashkil qiladi. Viruslar keltirib chiqaradigan 500 dan ortiq kasalliklar ma'lum. Virusli kelib chiqishi oyoq va og'iz kasalligi, teri zararkunandalari, cho'chqa isitmasi va boshqalar kabi o'ta xavfli kasalliklarda aniqlangan. Virusologiyani umumiy va xususiyga boʻlish mumkin. Umumiy fan viruslarning tabiati va kelib chiqishi, tasnifi, tuzilishi va kimyoviy tarkibi, genetikasi va seleksiyasi, diagnostika va oldini olish usullari, virusga qarshi immunitet asoslarini o‘rganadi. Xususiy vir maxsus patogenlarning nomi va tizimli holatini, virionning tuzilishini, hajmini va barqarorligini, terapiyani, diagnostika usullarini va oldini olishni o'rganadi.

1. Rivojlanish tarixi. Birinchi davr qadimgi davrlardan 1892 yilgacha boshlanadi. Bu davrda mustaqil fan sifatida virusologiya mavjud emas edi. Bakteriologlar noma'lum etiologiyali kasalliklarni o'rganishdi. Ikkinchi davr - virusologiyaning o'zi fan sifatida shakllanishi - 1892-1950 yillarni qamrab oladi. bu davr rus botaniki D.I.ning kashfiyoti bilan boshlandi. Ivanovskiy (1898) tamaki mozaikasi kasalligining qo'zg'atuvchisi to'g'risida. Ivanovskiy tamaki kasalligining etiologiyasini o'rganar ekan, bu kasallik bakterial filtrlardan o'tadigan maxsus mayda mikroorganizmdan kelib chiqqanligini aniqladi. U yorug'lik mikroskopi ostida ko'rinmaydi. Sun'iy o'sish muhitida o'smaydi. Keyinchalik, shunga o'xshash MOlar boshqa o'simliklardan, shuningdek hayvonlar va odamlardan ajratilgan. Ular mustaqil guruhga - ultraviruslarga birlashtirilgan. 1930-yillarda virusologik amaliyotda tovuq embrionlaridan foydalanila boshlandi. 1956 yilda Stenli virusni uning asosiy tarkibiy qismlari - oqsil va nuklein kislotaga bo'lishga muvaffaq bo'ldi. 20-asrning 40-yillari oxirida Rudenberg elektron mikroskoplari yaratildi. Va yorug'lik Leeuvenguk tomonidan yaratilgan. Virusologiyaga hissa qo'shgan sovet olimlari: Jdanov, Lixachev, Syurin.

48. Bir qavatli birlamchi tripsinlangan hujayra kulturalarini olish usuli. Virusni ko'rsatish uchun bir qatlamli hujayralar kerak. U to'qimalar yoki organlardan tripsin bilan davolash orqali olinadi. Bir qatlamli bo'lganlar 4 guruhga bo'linadi: birlamchi diploid yoki yarim payvandlangan; To'qimalar eziladi va tripsin fermenti bilan tarqaladi. Keyin tripsin sentrifugalash orqali chiqariladi va hosil bo'lgan cho'kindiga ma'lum hajmdagi suyuq ozuqa muhiti qo'shiladi. Hujayralar shishaning ichki yuzasida bir qatlamda - bir qatlamda o'stiriladi. Sog'lom hayvonlarning organlariga doimiy ehtiyoj bor. VA 9-112 kunlik embrionlardan foydalaniladi. Ovoskopiya. Qobiqni qayta ishlash. Qaychi yordamida puga chegarasi ustidagi qobiqni kesib tashlang. Embrion steril tarzda chiqariladi. Hank eritmasi bilan yuving. Teri-mushak xaltasi tayyorlanadi. Hank eritmasi bilan yuving. Mato qaychi bilan maydalanadi. Tripsinatsiya kolbasiga o'tkazing. Kolba magnit aralashtirgichga 15 daqiqaga qo'yiladi. Suspenziya muzli idishda sovutiladi. Kolba qabul qiluvchiga filtrlang. Hujayra suspenziyasi 10-15 daqiqa davomida santrifüjlanadi. Tripsin chiqariladi. Hujayra cho'kmasidan birlashtirilgan massa tayyorlanadi, 1 ml li probirkalarga quyiladi va hujayralar o'stiriladi.

47. Asosiy eritmalar va ozuqa muhitlari.Kelib chiqishi bo'yicha Tabiiy oziqlantirish vositalari va sun'iy oziqlantirish vositalari mavjud. Tabiiy moddalar - biologik faollardan: embrion, allantoik hayotiylik va muvozanatli tuz eritmalari qo'shilishi. Sun'iy - alohida komponentlardan tayyorlangan. Ko'pincha universal oziqlantirish vositalari ishlatiladi yoki maxsus bo'lishi mumkin. Universal o'rtacha 199 va Igla o'rtacha. San'at vositalarining tarkibi aminokislotalar, vitaminlar, fermentlar va muvozanatli tuz eritmalarini, ba'zan esa indikatorni (fenol qizil) o'z ichiga olishi kerak. Ko'rsatkichning mohiyati rangni o'zgartirish orqali virusni aniqlashdir. Hujayra hayoti davomida pH kislotali tomonga o'zgaradi. Kislotali muhitda indikatorning rangi to'q qizildan sariq ranggacha o'zgaradi. Oddiy qon zardobi ba'zan ozuqaviy muhitga ozuqaviy muhit hajmining 100 foizi miqdorida qo'shiladi. Qon zardobi o'sish omili deb ataladi. U hujayra proliferatsiyasi uchun qo'shiladi, faqat o'sish muhitida . Foydalanish maqsadi bo'yicha: o'sish muhiti - sarum kiritilgan; qo'llab-quvvatlovchi - sarum yo'q. Balanslangan tuz eritmalari: ularning barchasi sho'r eritmaning hosilalari. Chuqur muhitini tayyorlash va hujayra madaniyati bilan barcha manipulyatsiyalar uchun asos sifatida ishlatiladi (biror narsani yuvish uchun). Bular Hanks va Erl yechimlari. Tarqatish eritmalari: hujayralarni boshqalardan va hujayralarni shishadan ajratish uchun. Pepsin, tripsin eritmalari. Shishadan - versinli eritmalardan. Versin eritmasi kaltsiy kationlarini bog'laydi.

50. Virus titri. Virus titri - virus miqdori, ya'ni virus o'z ichiga olgan material hajmining birligi uchun doza. 3 titrlash usuli: 1 usul: statistik baholangan ta'sir bilan virusning yuqumli ta'siriga ko'ra virusni titrlash. O'qish va menchu ​​usuliga ko'ra yoki Kerberga ko'ra. Titr 50% dozalarda ifodalanadi. Bu ED50. Ushbu titrlash usuli uchun har qanday biologik modeldan foydalanish mumkin, ammo bu model titrlangan virusga (hujayra madaniyati, embrionlar, laboratoriya hayvonlari) sezgir bo'lishi kerak. Infektsiyalangan biologik modellarning yuqumli ta'siriga ko'ra, ular quyidagilarga bo'linadi: klinik jihatdan tan olingan; patomorfologik o'zgarishlarga ko'ra; model vafot etganida; gemagglutininning to'planishi bilan. Ish natijalari virusning dozasiga bog'liq. Yuqumli ta'sirning 50 foizini keltirib chiqaradigan virusning dozasi tebranishlarga eng kam sezgir va barcha mumkin bo'lgan dozalar ichida eng aniqlanishi aniqlangan. Titr samarali 50 foizli dozalarda ifodalanadi. Bu ED 50 ga teng. Amaldagi biologik modelga va olingan effektga qarab, 50 foizlik dozani quyidagi birliklarda ifodalash mumkin: LD 50 - Bu o'limga olib keladigan ta'sir jihatidan tirik bo'lgan laboratoriya uchun olingan o'ldiradigan dozaning 50 foizini tashkil qiladi. ID 50- bu klinik belgilar yoki patomorfologik o'zgarishlar asosida laboratoriya tirik bo'lishi uchun aniqlangan 50 foizli yuqumli doz. ELD 50- bu tovuq embrionlarida natija yili bo'yicha aniqlangan 50 foiz embrion halokatli dozasi. EID 50- bu tovuq embrionlarida patomorfologik o'zgarishlar va gemagglutininning to'planishi bilan aniqlangan 50 foizli embrion yuqumli dozadir. TsPD 50- bu CPD tomonidan hujayra madaniyatida aniqlangan 50 foizli sitopatogen doza. Agar infektsiyalangan tizimlarda biz ID 50 ta'sirining 50 foizini kuzatmasak, titr o'qish va menyu orqali hisoblanadi: lg LD 50 = lg ECD - (% ECD yillari - 50%) / (ECD ning% yili - ECD ning % yillari) BULARNING HAMMA lg suyultirish koeffitsientiga ko'paytiriladi. 2-usul : yagona ta'sirni baholash bilan virusning yuqumli ta'siri bo'yicha. Hujayra madaniyatida blyashka hosil qilish usuli bilan bitta ta'sir mavjud. Chechak hosil qiluvchi birliklar yoki PFU blyashka hosil qiluvchi birliklarda ifodalanadi. Virusning 10 barobar suyultirilishini tayyorlang; sezgir biologik modelni tanlang; Virusning har bir suyultirilishida kamida 4 ta embrion infektsiyalanadi. Titr V*n ga bo'lingan T=a formulasi yordamida hisoblanadi. a - pockmarks yoki blyashka o'rtacha soni. V - moddiy tarkibning hajmi = 0,2. n - virusni suyultirish darajasi. 3-usul: GAENda virusning gemagglyutinatsion ta'siriga ko'ra. Ular RGA qo'yishdi.

38.Virusli infeksiyalarni laboratoriya diagnostikasi tamoyillari.

Laboratoriya tadqiqotlari yuqumli kasalliklar diagnostikasini o'rnatish, etiotropik terapiyani buyurish va davolash samaradorligini nazorat qilishda muhim rol o'ynaydi. Maxsus laboratoriya diagnostikasi jarayoni patogenni aniqlashga va yuqumli jarayon davomida inson tanasining javobiga asoslanadi. U uch bosqichdan iborat: materialni yig'ish, uni tashish (39-shpor) va laboratoriyada o'rganish: 1) Virusologik usul ikkita asosiy bosqichni o'z ichiga oladi: viruslarni ajratib olish va ularni aniqlash. Viruslarni ajratish uchun hujayra madaniyati, tovuq embrionlari va ba'zan laboratoriya hayvonlari ishlatiladi. Infektsiyalangan madaniyatlarda virusning mavjudligi o'ziga xos hujayra degeneratsiyasining rivojlanishi bilan belgilanadi, ya'ni. sitopatogen ta'sir, hujayra ichidagi inklyuziyalarni aniqlash, shuningdek, immunofloressensiya, ijobiy gemodsorbsiya va gemagglyutinatsiya reaktsiyalari orqali o'ziga xos antijeni aniqlashga asoslangan. Viruslar immunologik usullar yordamida aniqlanadi: gemagglyutinatsiyani inhibe qilish reaktsiyasi, komplementni fiksatsiya qilish, neytrallash, gel cho'kmasi, immunofluoresans. 2) Serologik reaksiyalar; 3) Immunologik usul (bioassaylar); 4) Elishay va PCR. Tekshiruv natijalarini olgandan so'ng va epidemiologik va klinik ma'lumotlarni hisobga olgan holda yakuniy tashxis qo'yiladi.

39. Patentni olish, tayyorlash va jo'natish. Virusolog uchun material. Tadqiqot.

Patni yig'ish, tashish va tekshirish. material veterinariya qonunchiligi bilan tartibga solinadi. Qabul qilishda virusning tropizmi hisobga olinadi - ma'lum bir kasallikda virusning afzal qilingan lokalizatsiyasi va patogenezi. Turg'unlikdan chiqish vaqti. tadqiqotining oxirigacha material - 2-4 soat. Agar sizga ko'proq vaqt kerak bo'lsa, uni saqlang (kimyoviy usullar - 50% glitserin eritmasi, jismoniy - muzlatish), lekin luministlar uchun emas. mikroskop. Maxsus joyga tashish bilan birga konteynerlar hujjat va kurer. Tayyorgarlik virusni hujayralardan ajratib olishni o'z ichiga oladi. Suyuqlik material - filtrlash va santrifüjlash. Bakteriyalarni tozalash uchun - bakterial. filtrlar va antibiotiklar (1 ml uchun 500-2000 dona), zamburug'lar uchun - fungitsidlar (1 ml uchun 25 dona), 30-40 daqiqa ushlab turiladi, pitata bilan emlanadi. muhit (aeroblar - MPA, MPB, MPZh, anaeroblar - Kitta-Tarozzi, zamburug'lar - Chapeka, Saburo). Zich patent materiali: 1) patent materialini 1-1,5 g oling; 2) qaychi bilan chopish; 3) steril bilan yuving. ohakdagi shisha yoki qum; 4) Hanks eritmasi bilan 10% suspenziya; 5) 2 marta muzlatish va eritish; 6) doka filtri orqali filtrlash; 7) sentrifugalash (3000 rpm, 15 min); 8) supernatant suyuqlik - virus o'z ichiga olgan material, u bakteriyalar (ozuqa muhiti) uchun sinovdan o'tkaziladi, antibiotiklar va fungitsidlar qo'shiladi.

40. Virusologiyada mikroskopik tadqiqot usuli.

1. Nur mikroskopiyasi: 1) chechak virusini aniqlash uchun (Morozovning kumushlash usuli); 2) inklyuziya jismlarini aniqlash (bu virionlarning to'planishi yoki hujayraning virusga reaktsiyasi qismlari yoki mahsulotlari; ular yadro ichidagi va sitoplazmik bo'lishi mumkin); 3) virus CPD ni aniqlash (yaxlitlash, parchalanish, o'lim); 4) simplastiyalarni aniqlash; 5) C/C bilan ishlash; 6) serolog tomonidan baholash. reaktsiyalar (ELISA, RGAd, RTGAd). 2. Luminesans mikroskop: mohiyati shundaki, UV nurlari bilan nurlanganda atomlar qo'zg'aladi, so'ngra yorug'lik nurlanishi shaklida energiya ajralib chiqishi bilan boshlang'ich holatga o'tadi, uning intensivligi xochlarda baholanadi (zumrad-yashil = ++). ++; yashil-sariq = ++; nurlanishdan oldin, preparat ftoroxromlar bilan bo'yalgan. Kompleks - TIVning mohiyati o'ziga xosdir. antikorning ftoroxrom bilan belgilangan sarum (konjugat) bilan o'zaro ta'siri. 3.Elektron mikroskop: 1) har qanday virusni aniqlash; 2) uning kattaligi, shakli, tuzilishi, simmetriya turi, ko'payishini o'rganish; 3) virusning hujayra bilan o'zaro ta'sirini o'rganish.

Mikrobiologik laboratoriyalar davlat sanitariya-epidemiologiya nazorati markazlari (TSGSEN), yuqumli kasalliklar va yirik kasalxonalar, teri-tanosil va sil kasalliklari dispanserlari tarkibiga kiradi. Idoraviy mansubligiga qarab, diagnostika ishlari bakteriologik, virusologik, mikologik va hokazo laboratoriyalarda olib boriladi, bu tegishli ko‘rsatmalar va qonun hujjatlari bilan tartibga solinadi. Ushbu qonun hujjatlariga muvofiq, laboratoriyalarning har biri faqat mikroorganizmlarning ma'lum guruhlari bilan ishlashi mumkin.

Markaziy Davlat Tibbiyot Universitetining bakteriologik laboratoriyalari III va 1U guruh mikroblari bilan ishlaydi, havo, ichak, yiringli-yallig'lanish va boshqalar tabiatdagi yuqumli kasalliklarning etiologik diagnostikasini o'tkazadi.

Virusologiya laboratoriyalari viruslar (gripp, poliomielit, gerpes va boshqalar), shuningdek, xlamidiya (ornitoz, genitouriya kasalliklari va boshqalar) va rikketsiya (Q isitmasi, tif va boshqalar) keltirib chiqaradigan kasalliklarning virusologik diagnostikasini amalga oshiradi.

O'ta xavfli infektsiyalar laboratoriyalarida o'ta xavfli mikrobial infektsiyalar (vabo, vabo, kuydirgi, brutsellyoz, tulyaremiya va boshqalar) va ularning ba'zilari virusli etiologiyali (Marburg, Ebola, chechak va boshqalar) tashxis qilinadi. Ish ayniqsa qat'iy qoidalarga muvofiq amalga oshiriladi.

Tegishli dispanserlarda dermatovenerologik guruh kasalliklari va sil kasalligi aniqlanadi.

Bakteriologik laboratoriyalar TsGSEN standart binolarda yoki maqsadga muvofiq, bajarilgan ish hajmi uchun mo'ljallangan binolarda joylashgan bo'lishi kerak. Har bir bakteriologik laboratoriya ular uchun zarur bo'lgan to'liq birliklarga ega bo'lishi kerak : testlarni qabul qilish va natijalarni berish uchun reestr, turli guruhlardagi bakteriyalar bilan ishlash qutilari, immunodiagnostik va molekulyar genetik testlar uchun xona, madaniy muhitlarni tayyorlash, sterilizatsiya, yuvish xonalari, sog'lom va tajriba hayvonlari uchun qutilari bo'lgan vivariy mavjud.

Har bir xona tegishli jihoz va jihozlar bilan jihozlangan.

Sterilizatsiya xonasida ma'lum bir modeldagi bug'li sterilizator bo'lishi kerak - vertikal yoki gorizontal va boshqalar.

Mikroorganizmlarni etishtirish, saqlash va boshqa ishlarni bajarish uchun uskunalarga kelsak, sizda quyidagilar bo'lishi kerak:

Ko'rsatmalarga muvofiq, madaniyatlar va boshqa biologik preparatlarni alohida saqlash uchun muzlatgichlar.

Korpuskulyar moddalarni, shu jumladan mikroorganizmlarni cho'ktirish uchun santrifugalar. Santrifugalar muzlatgichda saqlanishi kerak.

Berilgan haroratda bakterial madaniyatlarni etishtirish uchun termostatlar.

Mikronaerostatlar, kislorodsiz sharoitda anaeroblar deb ataladigan bakteriyalarni ko'paytirish uchun.

Distillangan suv ishlab chiqarish uchun distiller.

Turli o'lchamdagi paxta-doka tiqinlarini tayyorlash uchun apparat.

Kassa xonalarida quyidagilar bo'lishi kerak: biologik immersion mikroskoplar (jumladan, faza-kontrastli yoritgich, qorong'u maydon kondensatori), suv vannalari, muzlatgichlar, asboblar to'plami (bakteriologik halqalar, ignalar, skalpellar, pinsetlar, spatulalar, va boshqalar), bo'yoqlar to'plamlari, spirt, reagentlar, filtr qog'ozi, shisha, kislotalar, ishqorlar, spirtli lampalar va gaz gorelkalariga yozish uchun qalamlar. Dezinfektsiyali eritmasi bo'lgan idishlar (imzolangan, bu dezinfektsiyali eritmani tayyorlash sanasi bilan). Shisha idishlar : pipetkalar, probirkalar, kolbalar, flakonlar, Petri idishlari, matraslar, pasterlar va boshqalar.

Laboratoriyada ma’lum miqdorda tijorat ekinlari, test tizimlari va diagnostik zardoblar, diagnostik preparatlarning turli to‘plamlari bo‘lishi kerak.

Mikrobiologik laboratoriyalarda ishlashning ba'zi qoidalari:

1. Barcha xodimlar tibbiy xalat, kepka va shippakda ishlaydi. Agar kerak bo'lsa, niqob kiying.

2. Maxsus ajratilgan joylardan tashqari, laboratoriyada chekish, ovqatlanish va suv ichish taqiqlanadi.

3. Ish joyi namunali tartibda saqlanadi.

4. Agar yuqtirilgan material stolga, polga yoki boshqa sirtga tushsa, bu joyni dezinfektsiyali eritma bilan davolash kerak.

5. Mikroorganizm madaniyatini saqlash, jo'natish, berish belgilangan tartibda amalga oshiriladi.

6. Ish oxirida qo'lingizni sovun bilan yaxshilab yuving. Agar kerak bo'lsa, qo'llarni dezinfektsiyali eritmalardan biri bilan davolash mumkin va hokazo.

Virusologiya laboratoriyalari. Ular boshqa birliklardan butunlay ajratilgan bo'lishi kerak. Virusologiya laboratoriyalarining tuzilishida ixtisoslashuviga qarab maʼlum farqlar mavjud, ammo asosiy boʻlimlar mavjud. : muzlatgich, yuvish, dezinfeksiya, sof va infektsiyalangan hujayra madaniyati, viruslar bilan ishlash uchun qutilar, immunodiagnostik tadqiqotlar uchun xona, vivarium, tovuq embrionlari uchun xona - toza va infektsiyalangan.

Virusologiya laboratoriyasi bo'lishi kerak : echinish xonasi - kiyim, poyabzal, linoleum bilan qoplangan plitkali pollarni almashtirish uchun. Mesh bilan qoplangan derazalar. Ultraviyole lampalar. Muzlatgichlar talab qilinadi - 4 o C haroratda va ultra-sovutgich -20-40 o C va undan yuqori, chinni ohaklari, gomogenizatorlar, pestlelar, asboblar (qaychi, igna, shprits, skalpel, cımbız va boshqalar). 5-6 ming volgacha sovutadigan santrifugalar. va ultratsentrifugalar 30 ming volgacha. daqiqada yoki undan ko'p. Luminesans mikroskop. Tovuq embrionlarini va ular bilan ishlash vositalarini o'z ichiga olish uchun 37 o C da inkubatorlar. Infektsiyalangan tovuq embrionlarini inkubatsiya qilish uchun avtomatik parametrlarga ega termostatlar. Shisha idishlar va probirkalar uchun tokchalar, gorelkalar va boshqalar.

Virusologiya laboratoriyalarida ishlashning ba'zi qoidalari:

1. Virusologiya laboratoriyasiga faqat xodimlar kirishi mumkin. Bajarilayotgan ishlarga (xalat, qalpoq, poyafzal) muvofiq maxsus kiyimga almashtirish majburiydir.

2. Kirishdan oldin dezinfektsiyali eritma bilan namlangan bo'yra bo'lishini unutmang.

3. Kontaminatsiyalangan yoki shubhali kontaminatsiyalangan materiallar bilan barcha turdagi ishlar qat'iy ravishda ko'rsatmalarga muvofiq amalga oshirilishi kerak.

4. Kiyimdagi qo'shimcha atributlar bilan qutilarda ishlash talab qilinadi: niqob, ikki marta xalat, qo'lqop, sochiq, xavfsizlik ko'zoynaklari va boshqalar.

6. "Avariya" (virusli materialni purkash) sodir bo'lgan taqdirda, siz menejerni yoki boshqa shifokorni chaqirishingiz kerak (qo'ng'iroq tugmachasini bosib qutidan chiqmasdan) va ko'rsatmalarga muvofiq birgalikda dezinfeksiya qilish kerak.

7. Agar kerak bo'lsa, ko'rsatmalarga muvofiq emlash.

8. Ishlatilgan virusli material avtoklavda 1,5 atm haroratda 30 daqiqa davomida yo'q qilinadi.

9. Ishni tugatgandan so'ng, siz oddiy xalat va poyabzalga o'tishingiz kerak, qutidagi xonada qalpoq yoki ro'mol, qo'lingizni sovun bilan yuving va kerak bo'lganda ularni dezinfeksiya qiling.

10. Ishdan oldin qutilar formalin bug'lari va ultrabinafsha nurlari bilan ishlov beriladi. Ishdan keyin xloraminning 2% eritmasi va boshqalar bilan davolang.

Mikrobiologiya va virusologiya kafedrasida talabalarning ishlash qoidalari :

1. Navbatchilarning vazifalari:

Laborant bilan birgalikda asboblar (bakterial ilmoqlar, cımbızlar va boshqalar), darslar uchun mo'ljallangan materiallar (probirkalar va kulturalar, shishaga yozish uchun qalamlar, gentian binafsharang qog'ozlar, bo'yoqlar va boshqalar) mavjudligi va miqdorini tekshiring. ), mikroskoplarning holati, ob'ekt va qopqoq ko'zoynaklari va boshqalar Navbatchilar uchun tegishli jurnalga yozuvlar kiriting. Laborantdan o'quv materialini oling va talabalarga tarqating. Mikroorganizmlarga qarshi emlashlar bo'lgan stakan va probirkalarni alohida oling.

Mashg'ulotlar oxirida navbatchi ish stollarining holatini tekshiradi, ularni tozalashdagi barcha nuqsonlarni bartaraf qiladi, asboblar, mikroskoplar va boshqalar mavjudligini tekshiradi. Probirkalar va kulturali stakanlar individual ravishda laborantga topshiriladi; navbatchining daftarini to‘ldiradi, xonani laborantga topshiradi va chiroqlarni o‘chiradi.

2. Talabalarning majburiyatlari :

Ishni boshlashdan oldin. Tibbiy xalat kiying, mahkamlang, qalpoq yoki sharf kiying. Portfel va kitoblarni stol tortmasiga yoki sumkalarga joylashtiring. Ish stoli va mikroskopning holatini tekshiring. Ish stoliga daftar, qalam, qalamlarni, shu jumladan rangli narsalarni qo'ying.

Ish paytida. Mikroskop, shisha idishlar, asboblar va boshqalar bilan ehtiyotkorlik bilan ishlang. Idishlarni mikroblar bilan belgilang. Madaniyatlar bilan ishlashni tugatgandan so'ng pastadirni sterilizatsiya qiling. Voqea sodir bo'lgan taqdirda (stol yuzasi, zamin, kiyim-kechak, teri va boshqalarning yuqumli material bilan ifloslanishi) voqea haqida o'qituvchiga xabar bering va ifloslanishni birgalikda yo'q qiling.

Ishdan so'ng. Ish joyingizni tartibga soling. Emlangan stakan va probirkalarni navbatchiga topshiring. Chiqindilarni navbatchiga topshiring. Ishlatilgan barcha asboblarni alkogolli chiroq olovida yoqish kerak, shishani dezinfektsiyali eritma bilan bankalarga tushirish kerak. Mikroskop va ish stolini tartibga soling. Qo'lingizni sovun bilan yaxshilab yuving.

Mashg'ulot xonalariga xalat yoki qalpoqsiz kiring va ishlang. Bo'lim binolarida ovqat iste'mol qiling. Chekish, axlat tashlash. Stol va deraza tokchalariga portfel, shlyapa va darsliklarni joylashtiring. Uskunaning shikastlanishi. Nopok stollar. Qattiq gapiring va kuling, choping va bo'lim ishiga aralashing.

Bir paytlar Biologiya fakultetida SSSRda 4-chi xavfsizlik darajasidagi laboratoriyada xavfli yuqumli kasallikka chalingan ikkita "probirka" yo'qolganligi haqida afsona bor edi. Ular o'zlari bilan ishlagan odamni topishga harakat qilishdi, lekin u ta'tilga chiqdi. Vahima kuchayib, avjiga chiqdi va direktorga Yaltadan qo'ng'iroq qilishdi va bizda sizning xodimingizning jasadi bor, iltimos, uni olib keling, deb aytishdi. Direktorning javobi qisqa va mantiqiy edi: "Biz sizga kelmaymiz, siz ham bizga kelmang." Aytishlaricha, u xayolida Yaltagacha bo'lgan masofani taxmin qilgan. Keyinchalik ma'lum bo'lishicha, xodim shoshib qolgan va namunalar utilizatsiya qilinganiga e'tibor berishni unutgan va afsuski, u Yaltada cho'kib ketgan. Xavfli kasallikning avj olishi to'xtatildi :) .

Ammo eng xavfli kasalliklar saqlanadigan va o'rganiladigan laboratoriyalar qanday ko'rinishini ko'rish hali ham qiziq. Xalqaro amaliyotda biologik patogenlar bilan ishlash uchun 4 darajali laboratoriya mavjud. Biz hammamiz biologik xavf yoki biologik xavf belgisini bilamiz.

Men tartibda boshlayman. Eng oddiy va eng zararsizlari 1-darajali laboratoriyalardir. Ular yuqumli bo'lmagan deb hisoblangan hujayra madaniyatlari, viruslar va bakteriyalar bilan ishlaydi. Ular asosiy binodan ajratilmasligi kerak va ishchilar oddiy himoya vositalaridan foydalanadilar: xalat, qo'lqop va yuzni qisman himoya qilish.

2-chi himoya darajasi odatda 1-ga o'xshaydi, lekin ish paytida allaqachon cheklangan kirish bo'lishi kerak va barcha manipulyatsiyalar maxsus laminar xonalarda amalga oshiriladi. Bunday laboratoriyalarda ular engil kasalliklarni keltirib chiqaradigan infektsiyalarni, shuningdek, havo tomchilari bilan aniq o'tmaydigan infektsiyalarni o'rganadilar. Misol uchun, bu ba'zi gepatit, grippning keng tarqalgan shtammlari, salmonellalar.

3-darajada u yanada qiziqarli bo'ladi. Kirish uchun allaqachon qat'iy cheklovlar mavjud, laboratoriyaga kirishda ikkita eshik va vestibyul mavjud, bu xonalar orasidagi havo almashinuvini cheklash imkonini beradi. Kimdir laboratoriyada ishlayotgan bo'lsa, boshqa odamlar unga kira olmaydi. Siz filmlarda ko‘rgan bo‘lsangiz kerak, odatda boshqa xodimlar eshikni ichkaridagi odam ochib qo‘yishi uchun taqillatadi. Bu tashqaridagi odamga kirish imkoni yo'q degani emas, shunchaki tadqiqot paytida u erga hech kim bormasligi kerak, shuning uchun ular o'zlarini Shrek mushukidek ko'rsatishga harakat qilib, taqillatishadi, shunda ularga kirishga ruxsat beriladi. Patogenlarning barcha harakatlari tartibga solinadi va faqat maxsus laminar xonalarda amalga oshirilishi kerak. Havo qayta ishlanadi va aralashmasligi va asosiy binoning ventilyatsiyasiga kirmasligi kerak. Xodimlar ko'proq kiyim kiyishadi (qoidaga ko'ra, yuz, bosh va qo'llarni iloji boricha yopib qo'yish kerak, xalatlarning old tomonida tugmachalar bo'lmaydi, faqat orqada bog'langan). Ishdan keyin kiyimlar qayta ishlanadi, ammo bu hali shaxsiy himoya kostyumi emas. Bunday laboratoriyalarda allaqachon vaktsina yoki samarali dori mavjud bo'lgan o'lik kasalliklarni topish mumkin. Masalan, sariq isitma, G'arbiy Nil virusi va sil patogenlari.

4-daraja eng xavfli va yuqumli viruslar va bakteriyalar bilan ishlash uchun mo'ljallangan, ular uchun davolash yo'q. JSST ularning dizaynini o'ta murakkab deb ta'riflaydi va shuning uchun bugungi kunda ular asosan turli xil gemorragik isitmalarni, jumladan Ebola va Marburg virusini o'z ichiga oladi. Bu erda ortiqcha bosim bilan to'liq muhrlangan shaxsiy himoya kostyumlari (shuning uchun odamlar shishirilgan kauchuk o'yinchoqlarga o'xshaydi) allaqachon paydo bo'ladi. Haddan tashqari bosim kerak, shunda shikastlanganda havo kostyumdan chiqib ketadi va laboratoriya havosining kostyumga kirishiga yo'l qo'ymaydi. Laboratoriyaning o'zida, aksincha, xona bosimi tushib qolsa, havo uni tark etmasligi uchun biroz pasaytirilgan bosim saqlanadi.

Ishlash uchun qo'shimcha qoidalar mavjud, masalan, bunday laboratoriyalarda yolg'iz ishlash taqiqlanadi, sherikning mavjudligi majburiydir. Uchinchi darajali laboratoriyadan boshlab, har bir xodim o'zi bilan maxsus eslatma kartasini olib yurishi kerak, unda shubhali alomatlar paydo bo'lganda qo'ng'iroq qilishi kerak bo'lgan telefon raqamlari, shuningdek, davolovchi shifokor uchun ko'rsatmalar ko'rsatilgan. Agar siz laboratoriyadan tashqarida kimdir bilan muloqot qilishga qaror qilsangiz, buning uchun maxsus ulanishdan foydalanishingiz kerak bo'ladi - afsuski, siz baqira olmaysiz.

Kiyimni almashtirish yuqori xavfsizlik laboratoriyalarida marosimdir. 3-darajali laboratoriyalarda bo'lgani kabi, barcha kiyimlar butunlay olib tashlanadi va dushdan keyin tibbiy xodimlar kostyumiga o'xshash narsa qo'yiladi. Kombinezonga o'tishda kulgili tafsilotlardan biri - paypoq-shim va qo'lqop-yenglari orasidagi chegarani lenta bilan yopishtirish, aytmoqchi, shimlar paypoqlarga yopishtirilgan (sizni haqiqatan ham Batman kabi his qilishingiz mumkin); Lentadan keyin muhrlangan kostyumning o'zi qo'yiladi va havo manbaiga ulanadi. Bunday laboratoriyalar ko'rsatiladigan filmlarda ba'zida kostyumdan shiftga qadar spiral tarzda o'ralgan shlang cho'zilganligi va u orqali havo aslida kostyumga kirganligi ko'rinadi. Ishlayotganda eng qiyin narsa bu shlangga aralashmaslikdir, chunki odatda tarmoqqa ulangan changyutgich bilan sodir bo'ladi. Ammo xatoning narxi boshqacha.

Ushbu laboratoriyaga kirish uchun siz do'zaxning ettita doirasini, himoya darajalarini bosib o'tishingiz kerak: ko'p sonli jonlar, vakuum xonasi, ultrabinafsha nurlanish va ishlab chiquvchining tasavvuriga ega bo'lgan barcha narsalar (bu paranoyya rag'batlantiriladigan kam sonli kasblardan biridir. ). Aytishlaricha, aerobatika bu basseyn orqali devor ostiga sho'ng'ish kerak bo'lganda. Zamonaviy kostyumlar manipulyatsiya uchun juda qulay, ammo har qanday holatda siz mashq qilishingiz kerak, chunki stulda o'tirish kabi oddiy harakat ham qiyinchilik tug'dirishi mumkin - chunki siz atrofingizda nima bo'layotganini his qilishda qiynalayapsiz. Ammo yana bir muhim noqulaylik bor, laboratoriyaga kirishdan oldin (va siz ko'rib turganingizdek, jarayon unchalik oddiy emas), yaxshilab o'ylab ko'rishingiz kerak, chunki 4-darajali himoya xonalarida hojatxonalar yo'q. .shuning uchun siz tajriba oxirigacha chidashingiz kerak bo'ladi :) (Suv ichishdan ham voz kechganingiz ma'qul).

Ishdan so'ng, barcha namunalarni yo'q qilish uchun kostyumingiz bilan kimyoviy dushdan o'tishingiz kerak (dush bir necha daqiqa davom etadi, shuning uchun agar kimdir hali ham suv ichishga qarshi tura olmasa, bu daqiqalar abadiylikdek tuyulishi mumkin :) ). Keyinchalik, muntazam dush va fuqarolik kiyimlarini almashtirish.

Bunday laboratoriyaga misol sifatida men G'arb illyustratorlarining infografikasini keltirmoqchiman:

Turli favqulodda vaziyatlar bo'yicha chora-tadbirlar rejasi ham qiziqarli. Misol uchun, depressurizatsiya holatida agentlar ventilyatsiyaga oqib chiqa boshlaydi, bu esa har qanday patogenlarni o'chirishi kerak. Qoida tariqasida, bu vodorod periks va formaldegid kabi juda agressiv birikmalardir, shuning uchun bino qurilgan materiallar ularga chidamli bo'lishi kerak (yog'och va rangli fon rasmi bu erda mos kelmaydi, ammo zamonaviy echimlarni hali ham topish mumkin).

Ma’lum sabablarga ko‘ra bunday laboratoriyalarga jurnalistlar va xayrixohlar kiritilmaydi, shuning uchun laboratoriyani ichkaridan ko‘rish deyarli mumkin emas. Biroq Bostonda yangi 4-darajali laboratoriya ishga tushmasidan oldin u bilan tanishishdi va unda qanday ehtiyot choralari ko‘rilganini aytishdi. Siz ushbu ajoyib turni videoda ko'rishingiz mumkin, ammo, afsuski, u ingliz tilida.

4-darajali laboratoriyalar unchalik ko'p emas. Bilishimcha, AQShda ularning o'n beshtasi bor, Rossiyada esa bittasi bor, bu Koltsovodagi (Novosibirsk) "Vektor". Uning o'ziga xosligi shundaki, dunyoda faqat ikkita laboratoriya: Vektor va AQSh Kasalliklarni nazorat qilish va oldini olish markazlarida chechak shtammlari saqlanadi. Ularni butunlay yo'q qilish masalasi vaqti-vaqti bilan ko'tariladi, ammo yakuniy qaror hali qabul qilinmagan.

Odamlarning televizor tomonidan ehtiyotkorlik bilan o'stiriladigan viruslar va bakteriyalardan qo'rqishiga qaramay, ular odamlar o'ylaganchalik dahshatli emas. Bizning qo'rquvimiz viruslardan emas, balki jaholatdan tug'iladi. Qanchadan-qancha odamlar OIV bilan kasallangan odamlar bilan oddiygina muloqot qilishdan bosh tortdilar, garchi bu mutlaqo xavfsizdir. Eng muhimi, tavsiyalar va ko'rsatmalarga rioya qilishdir. Bunday laboratoriyalarda yuzaga keladigan barcha infektsiyalar tizim yoki kompyuter xatosi emas, balki insonning beparvoligi natijasidir. Shuning uchun, xavfsizlik ko'rsatmalarini diqqat bilan o'qing va tinglang va siz bilan hamma narsa yaxshi bo'ladi :).

Mavzuga qiziqqan har bir kishi ko'rishi mumkin :)